![]() Ministerio de Cultura y Educación Universidad Nacional de San Luis Facultad de Química Bioquímica y Farmacia Departamento: Bioquímica Área: Analisis Clinicos |
| I - Oferta Académica | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
| II - Equipo Docente | ||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
| III - Características del Curso | |||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
|||||||||||||||||||||||||||||||
| IV - Fundamentación |
|---|
|
El curso Prácticas en Laboratorios Biológicos corresponde a la última etapa formativa de la Tecnicatura Universitaria en Laboratorios Biológicos. Debido a su ubicación en el Plan de Estudios, integra y articula los conocimientos adquiridos en otras disciplinas para el desarrollo de un conjunto de capacidades básicas necesarias para desempeñar funciones de asistencia técnica, investigación y producción, entre otras, sustentadas en las Buenas Prácticas de Laboratorio (GLP, por sus siglas en inglés) y las Buenas Prácticas Clínicas (GCP, por sus siglas en inglés), según el ámbito de desempeño del laboratorio biológico.
|
| V - Objetivos / Resultados de Aprendizaje |
|---|
|
Objetivo General:
Promover que el/la estudiante fortalezca los conocimientos teóricos y las habilidades prácticas necesarias para el manejo de materiales e instrumental de laboratorio y para la ejecución de técnicas habituales o de rutina propias del laboratorio biológico. Objetivos específicos: • Desarrollar conocimientos y habilidades para el manejo de animales de experimentación (rata y ratón). • Adquirir destrezas en las rutinas de mantenimiento y uso de los equipos de laboratorio. • Integrar los conocimientos adquiridos durante la carrera y aplicarlos al desarrollo de diferentes técnicas propias del laboratorio biológico. • Aplicar normas de higiene, seguridad, calidad, confiabilidad y cuidado del ambiente durante la realización de ensayos. • Fortalecer la capacidad para trabajar en equipo e interactuar con profesionales vinculados al laboratorio biológico. |
| VI - Contenidos |
|---|
|
PROGRAMA ANALÍTICO Y DE EXAMEN
UNIDAD 1 Cuidado de animales de experimentación (rata/ratón). Guías sobre Cuidado y Uso de animales de experimentación. Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (CICUAL)-FQByF, UNSL. Aspectos bioéticos en la experimentación animal. Las Tres R: reducción, refinamiento y reemplazo. Propuesta de otras R: Reciclaje, Responsabilidad. Bioterios. Disposición A.N.M.A.T. N° 9236/2023 Régimen de Buenas Prácticas en Bioterios. UNIDAD 2 Procedimientos experimentales en ratas y ratones de laboratorio. Técnicas de sujeción. Sujeción con restricción de movimiento. Manipulación de crías. Métodos para la identificación de animales. Sexado. Ciclado: fundamentos de la citología vaginal. Vías de administración de sustancias. Consideraciones prácticas. Toma de muestras. Eutanasia en ratas y ratones: métodos aceptados y aceptados con condiciones. UNIDAD 3 Agua para uso en laboratorios biológicos. Parámetros de calidad. Agua destilada, agua bidestilada, agua purificada por osmosis inversa e intercambio iónico, agua ultrapura (Milli-Q) y agua libre de nucleasas. Métodos de purificación de agua. Diferentes usos en el laboratorio. UNIDAD 4 Uso y mantenimiento de instrumentos del laboratorio. Micropipetas: sus partes, cuidados básicos y control del instrumento; técnicas de pipeteo. Balanza analítica: cuidados básicos, reglas de limpieza y calibración. Medidores de pH: tiras reactivas y pH-metro digital. Funcionamiento, cuidado y calibración de un pH-metro digital. UNIDAD 5 Ácidos Nucleicos. Fundamentos técnicos y procedimientos básicos para el análisis de la expresión de genes. Método de extracción y cuantificación de ácidos nucleicos. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR): pasos y factores a tener en cuenta. Genotipificación. Termociclador. Electroforesis en gel de agarosa. UNIDAD 6 Métodos de lisis de células y tejidos para la obtención de extractos biológicos destinados al estudio de proteínas, metabolitos y otras moléculas de interés biológico: sonicación, molienda con nitrógeno líquido, Bead Beater, homogeneización mecánica y lisis química (buffers de lisis). Óxido nítrico: relevancia biológica. Metabolitos estables del óxido nítrico (nitritos y nitratos). Determinación espectrofotométrica de nitritos mediante la reacción de Griess en sobrenadantes de muestras biológicas lisadas. |
| VII - Plan de Trabajos Prácticos |
|---|
|
Trabajo Práctico Nº 0: Seminario sobre Normas de Bioseguridad en Laboratorios Biológicos.
Trabajo Práctico Nº 1: Seminario sobre cuidado de animales de experimentación. Trabajo Práctico Nº 2: Visita al Bioterio-UNSL. Sujeción, sexado y ciclado de ratas. Elaboración de un Procedimiento Operativo Estandarizado (POE). Trabajo Práctico N° 3: Proyección de material audiovisual: administración de sustancias, toma de muestras y métodos de eutanasia en rata/ratón. Llenado de Protocolo de experimentación/docencia (CICUAL-UNSL). Trabajo Práctico Nº 4: Seminario sobre los diferentes métodos para obtención de agua pura para uso en laboratorios biológicos. Trabajo Práctico Nº 5: Calibración y uso de un pH-metro digital. Preparado de solución buffer con pH específico. Elaboración de un POE. Trabajo Práctico Nº 6: Seminario sobre aislamiento de ácidos nucleicos y técnica de PCR. Esterilización de materiales. Elaboración de protocolo de trabajo. Trabajo Práctico Nº 7: Ejecución de la técnica de PCR para la genotipificación de ratones. Trabajo Práctico Nº 8: Preparación de gel de agarosa y corrida electroforética de los productos de amplificación. Interpretación de resultados. Trabajo Práctico Nº 9: Seminario teórico-práctico sobre métodos de lisis de muestras biológicas. Trabajo Práctico Nº 10: Relevancia biológica del óxido nítrico. Determinación de nitritos mediante la reacción de Griess en sobrenadante de muestras biológicas lisadas. Análisis e interpretación de resultados. Trabajo Práctico Nº 11: Encuentro de integración. |
| VIII - Regimen de Aprobación |
|---|
|
Regularización del curso:
-El/la estudiante deberá cumplir con las exigencias de correlatividad establecidas en el Plan de Estudios de la carrera (OCD-2-15/12). -Cuando el/la estudiante asista al laboratorio, deberá demostrar pleno conocimiento de los contenidos teóricos correspondientes a la práctica. Asimismo, deberá contar con la correspondiente Guía de Trabajos Prácticos, cuaderno de laboratorio, guardapolvo, barbijo y guantes de látex descartables. -Cada estudiante registrará en su cuaderno de laboratorio los resultados obtenidos, criterios de trabajo y demás observaciones relativas a cada Trabajo Práctico. Estos registros serán visados por el Jefe de Trabajos Prácticos y considerados indispensables para la aprobación de los Trabajos Prácticos o de actividades especiales. -El/la estudiante debe llegar puntualmente a cada Trabajo Práctico (tolerancia de 5 minutos). En caso de tardanza, deberá rendir un cuestionario escrito u oral al finalizar el mismo. -El/la estudiante debe aprobar el 100% de los Trabajos Prácticos. Para ello, deberá aprobar al menos el 80% de los mismos en primera instancia y podrá optar por la recuperación del resto de los prácticos desaprobados. -La evaluación de los estudiantes será continua e incluirá la observación de su participación activa durante las actividades prácticas, así como la realización de cuestionarios, informes, seminarios u otras actividades evaluativas definidas por el equipo docente. Aprobación por el régimen de promoción sin examen: -El/la estudiante debe cumplir con las exigencias de correlatividad que establece el Plan de Estudios de la carrera (OCD-2-15/12). -Para mantener la condición de promocional, el/la estudiante debe aprobar el 100% de los Trabajos Prácticos y un examen integrador (modalidad: oral) con una calificación no menor de siete (7). En la nota final de aprobación se contemplarán las distintas instancias evaluativas propuestas para el cursado. -En el caso de no cumplir alguna de las exigencias de promocionalidad, el/la estudiante automáticamente pasará al Régimen de Alumnos Regulares. Estudiantes libres: NO se contempla la posibilidad de rendir la asignatura en condición de estudiante libre. |
| IX - Bibliografía Básica |
|---|
|
[1] Arguello M. Instrumentación y manipulación de micropipetas automáticas, usos y cuidados. 2015.
[2] ASTM International. ASTM D1193-24. Standard Specification for Reagent Water. 2024. [3] Brown TA. Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction. 8th ed. Wiley-Blackwell. 2020. [4] DISPOSICIÓN ANMAT N° 9236/2023. Régimen de Buenas Prácticas en Bioterios. [5] Guía de Trabajos Prácticos: Prácticas en Laboratorios Biológicos. Material Didáctico para Estudiantes (MDE). FQByF, UNSL. 2020. ISSN 2545-7683. [6] Guía General para el Cuidado y Uso de Animales-Parte 1. Material Didáctico para Estudiantes (MDE). FQByF, UNSL. 2022. ISSN 2545-7683. [7] Guía General para el Cuidado y Uso de Animales-Parte 2. Material Didáctico para Estudiantes (MDE). FQByF, UNSL. 2023. ISSN 2545-7683. [8] Lee PY, Costumbrado J, Hsu CY, et al. Agarose gel electrophoresis for the separation of DNA fragments. J Vis Exp. 2012;(62):e3923. [9] Lundberg J, Weitzberg E. Nitric oxide signaling in health and disease. Cell. 2022; 185:2853-2878. [10] METTLER TOLEDO. Cleaning Recommendations and Regulations for Balances. 2017. [11] METTLER TOLEDO. Habilidades fundamentales para el laboratorio. Guía para conseguir la calidad de las mediciones. 2020. [12] Salazar Montes AM, Sandoval Rodríguez AS, Armendáriz Borunda JS. Biología Molecular. Fundamentos y aplicaciones en las ciencias de la salud. México: McGraw-Hill Education. 2013. [13] Valdivia-Medina RY, Pedro-Valdés S, Laurel-Gómez M. Agua para usos en laboratorios. Boletín Científico Técnico INIMET. 2010; pp. 3-10. ISSN 0138-8576. |
| X - Bibliografia Complementaria |
|---|
|
[1] ¿Cómo hacer un POE? Disponible en: https://www.bioterios.com/post.php?s=2013-04-21-cmo-hacer-un-poe
[2] ARRIVE Guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research. PLoS Biology. 2020. [3] CK-12 Foundation. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Disponible en: https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/biotechnology/a/polymerase-chain-reaction-pcr [4] Cora MC, Kooistra L, Travlos G. Vaginal cytology of the laboratory rat and mouse: review and criteria for the staging of the estrous cycle using stained vaginal smears. Toxicol Pathol. 2015;43(6):776-793. [5] National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. 8th ed. National Academies Press. 2011. |
| XI - Resumen de Objetivos |
|---|
|
Objetivo general:
Promover que el/la estudiante fortalezca los conocimientos teóricos y las habilidades prácticas necesarias para el manejo de materiales e instrumental de laboratorio y para la ejecución de técnicas habituales o de rutina propias del laboratorio biológico. Objetivos específicos: • Desarrollar conocimientos y habilidades para el manejo de animales de experimentación (rata y ratón). • Adquirir destrezas en las rutinas de mantenimiento y uso de los equipos de laboratorio. • Integrar los conocimientos adquiridos durante la carrera y aplicarlos al desarrollo de diferentes técnicas propias del laboratorio biológico. • Aplicar normas de higiene, seguridad, calidad, confiabilidad y cuidado del ambiente durante la realización de ensayos. • Fortalecer la capacidad para trabajar en equipo e interactuar con profesionales vinculados al laboratorio biológico. |
| XII - Resumen del Programa |
|---|
|
Unidad 1: Cuidado de animales de experimentación (rata/ratón). CICUAL-FQByF, UNSL. Bioterios.
Unidad 2: Procedimientos experimentales en ratas y ratones de laboratorio. Unidad 3: Agua para uso en laboratorios biológicos. Unidad 4: Uso y mantenimiento de instrumentos del laboratorio. Unidad 5: Ácidos Nucleicos. Fundamentos técnicos y procedimientos básicos para el análisis de la expresión de genes. Unidad 6: Métodos de lisis de células y tejidos para el estudio de proteínas u otras moléculas de interés biológico. El óxido nítrico y sus metabolitos. Trabajo Práctico Nº 0: Normas de bioseguridad en Laboratorios Biológicos. Trabajo Práctico Nº 1: Seminario sobre cuidado y uso de animales de experimentación (rata/ratón). Trabajo Práctico Nº 2: Visita al Bioterio-UNSL. Sujeción, sexado y ciclado de ratas. Trabajo Práctico N° 3: Proyección de material audiovisual: administración de sustancias, toma de muestras y métodos de eutanasia en rata/ratón. Protocolo CICUAL-UNSL. Trabajo Práctico Nº 4: Seminario sobre los diferentes métodos para obtención de agua pura para uso en laboratorios biológicos. Trabajo Práctico Nº 5: Calibración y uso de un pH-metro digital. Trabajo Práctico Nº 6: Seminario sobre aislamiento de ácidos nucleicos y técnica de PCR. Trabajo Práctico Nº 7: Ejecución de la técnica de PCR para la genotipificación de ratones. Trabajo Práctico Nº 8: Electroforesis en gel de agarosa. Trabajo Práctico Nº 9: Seminario teórico-práctico sobre lisis de muestras biológicas. Trabajo Práctico Nº 10: Determinación de nitritos mediante la reacción de Griess. Trabajo Práctico Nº 11: Encuentro de integración. |
| XIII - Imprevistos |
|---|
|
|
| XIV - Otros |
|---|
|
La visita Guiada al Bioterio de la UNSL será llevada a cabo por Personal Técnico del Bioterio: Fernanda Toledo (IMIBIO-SL, CONICET), Técnica Universitaria en Gestión Integral de Bioterio; Manuel Arroyuelo (UNSL), Jefe de
Departamento Bioterio Central de la FQByF; Rubén Darío Toranzo (UNSL), personal Nodocente del Bioterio. |