![]() Ministerio de Cultura y Educación Universidad Nacional de San Luis Facultad de Química Bioquímica y Farmacia Departamento: Bioquímica Área: Morfologia |
I - Oferta Académica | ||||||||||
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II - Equipo Docente | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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III - Características del Curso | |||||||||||||||||||||||||||||||
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IV - Fundamentación |
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El Curso Técnica Histológica se dicta para alumnos de segundo año de la carrera Técnico Universitario en Laboratorios
Biológicos. En el mismo se impartirán los conocimientos básicos para el desarrollo de las diferentes técnicas que se utilizan en el Laboratorio de Histología destinadas al estudio de muestras de origen animal, tanto a nivel de microscopía óptica como electrónica. Durante el desarrollo del Curso el alumno adquirirá destrezas en lo referente a la organización, instrumental y reactivos necesarios en un Laboratorio de Histología, como así también en técnicas histológicas convencionales, histoquímicas e inmunohistoquímicas. El alumno adquirirá criterios para la selección de las técnicas a utilizar según las necesidades y para detectar posibles artefactos de técnicas que puedan interferir en una correcta descripción. Se darán los fundamentos de microscopía óptica, microscopía electrónica y sus diferentes variantes. |
V - Objetivos / Resultados de Aprendizaje |
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*Estudiar las técnicas y metodologías para la obtención de especímenes histológicos y su diagnóstico al microscopio óptico.
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VI - Contenidos |
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PROGRAMA ANALÍTICO DE EXAMEN:
Bolilla 1. Organización tisular de los mamíferos. Distintos tipos de tejidos, clasificación, estructura e histoarquitectura tisular. Obtención de muestras. Precauciones. Generalidades de la técnica histológica. Fijación. Concepto, generalidades y condiciones para lograr una correcta fijación. Clasificación y propiedades de los reactivos fijadores. Artificios de fijación. Bolilla 2. Inclusión de las muestras biológicas: Generalidades. Tratamiento preliminar de las muestras: deshidratación. Reactivos deshidratantes y aclarantes. Medios de inclusión; parafina, resinas epoxídicas. Moldes de inclusión. Errores de inclusión. Bolilla 3. Métodos para obtención de cortes histológicos. Generalidades. Micrótomos: Usos y cuidados. Micrótomo de deslizamiento y rotación. Micrótomo de Congelación. Cuchilla ó navaja, afilado y asentado. Tipos, cuidados y uso de las cuchillas. Confección de los cortes: Características de un buen corte. Estiramiento. Formas de recoger un corte. Pegado de las secciones histológicas. Medios de adhesión: Albúmina, gelatina. Artificios de seccionamiento. Bolilla 4. Coloraciones. Generalidades. Colorantes. Composición química, comportamiento de los colorantes y clasificación. Acidofilia y basofilia. Ortocromasia y metacromasia. Coloración de Hematoxilina-Eosina. Preparación de la hematoxilina de Harris. Técnica tricrómica de Masson. Otros métodos tricrómicos de importancia. Montaje de las preparaciones coloreadas para preparados deshidratados (permanentes), Permount, Entellán, DPX, Polymount, etc. Montaje para preparados no deshidratados (temporarios); glicerina. Precauciones del montaje. Artificios de coloración. Bolilla 5. Histoquímica: Concepto y generalidades. Técnica de ácido periódico-reactivo de Schiff (PAS) para glucoproteínas. Sudán para lípidos. Impregnaciones metálicas, concepto y generalidades. Técnicas argénticas. Técnicas para el estudio de muestras óseas, conceptos generales. Método de descalcificación. Bolilla 6. Inmunohistoquímica: Concepto y generalidades. Antígeno y Anticuerpo. Reacción Antígeno Anticuerpo. Anticuerpos primarios, secundarios y monoclonales. Marcadores enzimáticos y fluorescentes. Concepto de sensibilidad y especificidad de una prueba inmunohistoquímica. Técnicas directas e indirectas. Precauciones. Controles de calidad. Otras técnicas de importancia clínica. Bolilla 7. Métodos para microscopía electrónica de transmisión y de barrido: Generalidades. Obtención y fijación de las muestras. Post-fijación. Inclusión. Ultramicrótomos. Cuchillas de diamante y vidrio. Cortes Finos y ultrafinos. Grillas. Contrastes, acetato de uranilo y citrato de plomo. Diferentes tipos de Microscopios ópticos: de fase, de polarización, campo oscuro, fluorescencia y confocal. |
VII - Plan de Trabajos Prácticos |
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TRABAJOS PRÁCTICOS: dictado virtual utilizando google meet, classroom, padlet, canva, cmaptools, google slides, google drive, para el dictado de las clases teóricas, clases de consultas, exámenes parciales y los siguientes trabajos
prácticos: 1-Tejidos epitelial, conectivo, muscular y nervioso. 4 (cuatro) clases. 2- Laboratorio de Histología: Seguridad e Higiene. Preparación de mezclas fijadoras. 3- Obtención de muestras y fijación para microscopía óptica. 4- Deshidratación de la muestra. 5- Inclusión de la muestra en parafina. 6- Cortes histológicos. Micrótomo de deslizamiento y rotación (Parte I). 7- Preparación colorantes. Coloración de Hematoxilina-Eosina 8- Obtención de extendidos sanguíneos. Coloración de May Grünwall-Giemsa (MGG). 9- Preparación de reactivos y desarrollo de la técnica histoquímica de PAS. 10- Técnica inmunohistoquímica. 11- Microscopía óptica: tipos de microscopios, fundamentos y usos. Microscopía electrónica: Ultramicrótomo y microscopios electrónicos de transmisión y de barrido. |
VIII - Regimen de Aprobación |
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Régimen de Aprobación: dictado 2021 virtual y presencial al finalizar la cursada donde se realizan las diferentes actividades prácticas y observaciones microscópicas.
Régimen Regularidad (con examen final): Aprobación de 2 (dos) exámenes parciales, con 2 (dos) recuperaciones cada uno. Régimen Promoción: Aprobación de primera instancia con calificación mínima de 7 (siete) de 3 (tres) exámenes parciales. |
IX - Bibliografía Básica |
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[1] BIBLIOGRAFÍA:
[2] - Técnicas de Histología Animal. Martoja R. y Martoja-Pierson M. Editorial Toray-Masson. (Barcelona). 1970. [3] - Histoquímica. Teórica y Aplicada. A.G. Everson Perase Editorial Aguilar. 1960. [4] - Manual de Microscopía Electrónica para Biólogos. Mercer E.H. y Birbeck M.S.C. Editorial Blume. 1974. [5] - Staining Methods for Sectioned Material. Lewis P.R. and Knight D.P. Edit. Audrey M. Glauert. Elsevier. 1977. [6] - Introduction to Immunocytochemistry. Polak J.K. and Van Noorden S. Scientific Published. 1997. [7] - Texto y Atlas de Histología. Gartner L. and Hiatt J. Editorial Mc Graw Hill. 2008. [8] - Histología; Texto y Atlas color con Biología Celular y Molecular. Ross M. and Pawlina W. 6° Edición; Editorial Médica [9] Panamericana. 2011. [10] - Apuntes teóricos del Curso, redactados por el Profesor Responsable y guía de trabajos prácticos. [11] - Apuntes Teóricos, con actualización permanente, confeccionados por los Docentes del Curso. |
X - Bibliografia Complementaria |
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XI - Resumen de Objetivos |
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XII - Resumen del Programa |
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Organización tisular de los mamíferos. Distintos tipos de tejidos, clasificación, estructura e histoarquitectura tisular. Técnicas
Histológicas: metodologías, fundamentos y alcances. Microscopía óptica: fijación, clasificación de los fijadores. Deshidratación e inclusión. Preparación de cortes y extendidos. Coloración: basofilia y acidofilia, ortocromasia y metacromasia. Métodos histoquímicos, citoquímicos e inmunohistoquímicos. Microscopio de luz: fundamento. Unidades en microscopía. Concepto generales sobre: microscopía de fase, de polarización, campo oscuro y fluorescencia. El principio de la microscopía confocal, electrónica de transmisión y barrido. |
XIII - Imprevistos |
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Debido a que el segundo cuatrimestre 2021 cuenta con 14 semanas, la diferencia horaria entre 105 y 98 (crédito semanal del curso de 7 hs) se destina a clases de consultas en horarios a convenir con los alumnos.
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XIV - Otros |
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